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一文看懂 | 如何用Annexin VPI法做細胞凋亡檢測
2025-02-07 細胞凋亡過程常伴隨著明顯的細胞形態(tài)學變化，比如細胞凋亡早期，質(zhì)膜內(nèi)側的磷脂酰絲氨酸會翻轉到細胞質(zhì)膜表面；而在凋亡的中后期，隨著細胞質(zhì)膜通透性的增大，一些較大分子的化合物，如碘化丙啶(PI)，便可自由擴散進入細胞，將細胞核染上紅色熒光。AnnexinVPI檢測法原理AnnexinV是一種鈣依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力特異性結合。它不能透過完整的細胞膜，而早期凋亡細胞的細胞膜是完好的，對PI有拒染性。但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI能透過細胞膜而使細胞核染上。因此Ann...
優(yōu)化原代細胞轉染效率的關鍵試劑與方法
2025-01-22 在生命科學研究領域，原代細胞作為接近體內(nèi)生理狀態(tài)的細胞模型，一直備受關注。然而，對原代細胞進行有效的基因操作卻面臨諸多挑戰(zhàn)，原代細胞轉染試劑的出現(xiàn)則為解決這一難題提供了關鍵途徑。原代細胞直接從生物體組織中分離獲得，保留了細胞的原始特性和功能，能更準確地反映細胞在體內(nèi)的真實行為。但由于其特殊的生物學特性，如生長緩慢、對外部刺激敏感等，使得將外源核酸導入原代細胞變得困難重重。傳統(tǒng)的轉染方法在原代細胞上往往效果不佳，要么轉染效率低，無法滿足實驗需求；要么對細胞毒性大，導致細胞大量死...
細胞培養(yǎng)實驗中胎牛血清FBS的作用有哪些
2025-01-22 胎牛血清（FetalBovineSerum，簡稱FBS）是一種常用于細胞培養(yǎng)的血清，胎牛血清富含多種生物活性成分，包括生長因子、激素、營養(yǎng)物質(zhì)等。這些成分對于細胞生長、分化和代謝具有重要作用。在細胞培養(yǎng)中，胎牛血清通常被用作培養(yǎng)基的添加劑，以提供細胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。為什么選擇牛血清牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。其中胎牛血清是品質(zhì)高的血清，因為胎牛還未接觸外界，...
提高轉染效率：低毒細胞轉染試劑的優(yōu)化與實踐
2025-01-21 在細胞生物學研究領域，細胞轉染技術是一項至關重要的工具，它能夠?qū)⑼庠春怂岱肿訉爰毎麅?nèi)，從而實現(xiàn)對基因功能的研究、蛋白質(zhì)表達調(diào)控等眾多關鍵實驗。而在這其中，低毒細胞轉染試劑正逐漸嶄露頭角，成為科研人員的得力助手。傳統(tǒng)的細胞轉染試劑往往存在細胞毒性較高的問題，這會對細胞的正常生理功能產(chǎn)生嚴重影響。高毒性可能導致細胞存活率降低，細胞形態(tài)發(fā)生改變，甚至引發(fā)細胞凋亡。這不僅干擾了實驗結果的準確性，還限制了某些對細胞狀態(tài)要求苛刻的研究。低毒細胞轉染試劑的出現(xiàn)則有效解決了這些問題。其最大...
慢病毒濃縮液：病毒回收率高達92%
2025-01-10 慢病毒載體可感染分裂細胞及非分裂細胞。其轉移基因片段容量較大，目的基因表達時間較長，不易引發(fā)宿主免疫反應等諸多優(yōu)點；因此，慢病毒己經(jīng)成為表達外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一，并且應用越來越廣泛。慢病毒濃縮液介紹EZ慢病毒濃縮液是一種快速濃縮慢病毒的產(chǎn)品，使用未濃縮病毒上清與本產(chǎn)品低溫孵育后低速離心即可獲得濃縮病毒液。不同于傳統(tǒng)的耗時耗力的超濾、超速離心法，使用本產(chǎn)品操作簡便、快捷、安全，回收率高。慢病毒濃縮液優(yōu)勢?高濃縮比：濃縮體積高達240倍，如：可將120mL的...
BCA蛋白定量試劑盒有什么作用（附帶產(chǎn)品說明書）
2025-01-10 BCA(Bicinchoninicacid)法是目前應用比較廣泛的蛋白質(zhì)濃度測定方法。基于雙縮脲反應，即在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)將Cu2+還原成Cu+，Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物，在562nm處有高的吸光值，該反應產(chǎn)物的量與蛋白質(zhì)濃度成正比。測定其在562nm處的吸光值，并與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。該方法快速靈敏、穩(wěn)定可靠且對不同種類蛋白質(zhì)變異系數(shù)很小。試劑盒中提供了濃度穩(wěn)定的蛋白標準品用于制作標準曲線。BCA蛋白定量試劑盒產(chǎn)品作用準確靈敏，線性范圍廣：BC...
干貨分享 | 細胞凍存與復蘇避坑指南
2025-01-08 細胞凍存和復蘇是細胞培養(yǎng)中的關鍵環(huán)節(jié)，直接影響細胞存活率和活力，關系到后續(xù)細胞實驗能否按照計劃有效地進行。要想做好細胞凍存和復蘇，首先請牢記下面這四個字：慢凍快融！1、為什么要慢凍快融？凍存細胞時，細胞內(nèi)外環(huán)境中的水會形成冰晶。如果直接將細胞凍存到-196℃的液氮中，由于凍結過程中胞外溶液中的水先結冰，使胞外溶液不斷濃縮，引起細胞電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水及蛋白質(zhì)變性等，會導致細胞受到機械性損傷。2、細胞凍存-讓你細胞安心沉睡3、細胞復蘇-讓細胞滿血復活■細胞拿取盡量減少樣...
CFDA, SE 細胞增殖示蹤熒光探針檢測原理與注意事項
2025-01-08 CFDA-SE可用于細胞示蹤，也可用于細胞增殖檢測。經(jīng)CFDA-SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA-SE常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。檢測原理CFDASE可以通過完好的細胞膜，進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶催化分解成CFSE。CFSE可以隨機地、不可逆地和細胞內(nèi)蛋白的賴氨酸殘基或其它氨基發(fā)生結合反應，并標記這些蛋白，CFDA-SE標記細胞呈綠色熒光。CFDA-SE標記的分裂細...

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