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RNA的提取方法總結(jié)
2022-12-09
這篇文章主要講的是幾種常用的RNA提取方法。1、異硫氰酸胍氯化銫超速離心法原理：使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì)，進(jìn)行密度梯度超速離心，RNA沉淀于管底，而DNA與蛋白質(zhì)在上清中。使用這種方法，不但能得到高質(zhì)量的RNA，而且能同時(shí)分離出細(xì)胞染色體DNA.本法對于冷凍時(shí)間長、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不易分離的組織標(biāo)本以及富含RNA酶的組織細(xì)胞(如胰腺)的RNA提取尤其適合。此法提取的RNA的質(zhì)量好和成功率高，已成為提取哺乳動物細(xì)...
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轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒?yàn)的效率
2022-11-30
轉(zhuǎn)染是一種將外來顆粒和核酸轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中的技術(shù)，它可以通過化學(xué)的方式來實(shí)現(xiàn)。轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒?yàn)的效率，從而可以在應(yīng)用基因和基因組令人難以置信的功能領(lǐng)域進(jìn)行大量研究。在所有轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中，轉(zhuǎn)染方式的選擇尤為重要。陽離子聚合物與帶負(fù)電荷的核酸序列結(jié)合，帶正電荷的復(fù)合物被細(xì)胞膜吸引并通過內(nèi)吞作用整合到宿主細(xì)胞中。此類試劑包括PLGA（聚乳酸-乙醇酸共聚物），一種可安全用于轉(zhuǎn)染程序的食品級聚合物，以及PBAE（聚-β-氨基酯），一種能夠保護(hù)DNA分子的聚合物在宿主細(xì)胞內(nèi)遞送。這些從P...
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微生物的培養(yǎng)方法步驟介紹
2022-11-29
微生物培養(yǎng)所培養(yǎng)的微生物通常是病菌、細(xì)菌、放線菌、真菌等，屬于生物培養(yǎng)的一種。微生物培養(yǎng)步驟：1.配置不同濃度的營養(yǎng)液稀釋液:取營養(yǎng)液1ml溶于9ml無菌水中,振蕩5min配成10%的溶液.2.將容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.3.將試管口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養(yǎng)皿中,在各培養(yǎng)皿上標(biāo)...
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蛋白酶K的性質(zhì)從這三個(gè)方面介紹
2022-11-27
蛋白酶K來源于林伯氏白色念球菌（TritirachiumalbumLimber），是一種與枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶。由于它能降解角蛋白（keratin），因此被命名為蛋白酶K。它是一種高活性的廣譜蛋白酶，在變性劑尿素或十二烷基磺酸鈉（sodiumdodecylsulfonate，SDS）溶液中依然能保持較高酶活力，所以被廣泛應(yīng)用于各種生物材料中的DNA或RNA的提取。蛋白酶K的性質(zhì)從這三個(gè)方面介紹：一、分子結(jié)構(gòu)蛋白酶K由一條肽鏈組成，包含277個(gè)氨基酸殘基，相對分子質(zhì)...
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高保真DNA聚合酶的定義及如何選擇
2022-11-08
DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中*組成部分，是參與DNA復(fù)制中的重要酶，被用在生物及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的各個(gè)研究方向上。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時(shí)間里，從早期被發(fā)現(xiàn)的TaqDNA聚合酶到現(xiàn)在，酶越來越多樣化。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進(jìn)。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應(yīng)了市場需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應(yīng)用方向等進(jìn)行介紹。一、什么是什么是高保真酶高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心，聚合中心具有5'→3...
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李記生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常見問題（一）
2022-11-07
涉及產(chǎn)品EZTransPlus細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（Ⅱ）貨號：AC04L011EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（高效）貨號：AC04L091/AC04L092EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（低毒）貨號：AC04L098/AC04L099其他轉(zhuǎn)染產(chǎn)品EZTransPro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP）貨號：AC04L032/AC04L033/AC04L034EZTransRNA轉(zhuǎn)染試劑貨號：AC04L051李記生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常見問題（一）Q1：李記有3款轉(zhuǎn)染試劑，這3款有什么區(qū)別？和Li**對比效果如何...
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細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一
2022-10-31
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透...
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MH培養(yǎng)基的原理及用法
2022-10-20
MH培養(yǎng)基為MH瓊脂培養(yǎng)基，微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫，指的是水解酪蛋白。所以MH培養(yǎng)基也成為水解酪蛋白培養(yǎng)基。常用作培養(yǎng)基原材料，提供細(xì)菌生長所需的生長因子。MH培養(yǎng)基的原理：牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。MH培養(yǎng)基的成分：酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g瓊脂12gMH培養(yǎng)基的用法：稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。...
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